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實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>本次實(shí)驗(yàn)需要樣品蛋白純化,實(shí)驗(yàn)要求需除去樣品中混有的PBS緩沖液,以提高蛋白的濃度;故此次實(shí)驗(yàn)室選用凈信科研者系列的冷凍真空冷凍離心濃縮儀JX-ZLN-B來(lái)對(duì)樣品組織進(jìn)行低溫濃縮,以便在保護(hù)樣品的同時(shí)獲得優(yōu)質(zhì)的樣品效果。
實(shí)驗(yàn)設(shè)備:冷凍真空冷凍離心濃縮儀(JX-ZLN-B)
樣品蛋白純化離心濃縮實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程:
1、在實(shí)驗(yàn)開始前,我們需要提前將實(shí)驗(yàn)所需的儀器設(shè)備,實(shí)驗(yàn)耗材以及樣品組織等準(zhǔn)備好
2、在實(shí)驗(yàn)開始前,需對(duì)儀器設(shè)備所需的冷阱溫度-65℃進(jìn)行設(shè)置,點(diǎn)擊儀器設(shè)備的制冷按鈕,對(duì)儀器設(shè)備進(jìn)行提前預(yù)冷操作
3、在儀器設(shè)備的參數(shù)設(shè)置處,需按樣品的實(shí)驗(yàn)要求對(duì)其依次進(jìn)行程序參數(shù)的設(shè)置:速度、時(shí)間和溫度;選定實(shí)驗(yàn)所需要的程序,點(diǎn)擊溫度設(shè)置開始提前加熱
4、待主機(jī)的預(yù)熱溫度和冷阱預(yù)冷溫度都達(dá)到所設(shè)置的程序參數(shù)后,即可將已經(jīng)配置好的10ml樣品放置在離心濃縮儀設(shè)備中進(jìn)行配比;要注意管口為開口狀態(tài),點(diǎn)擊START開始運(yùn)行
5、在儀器設(shè)備的運(yùn)行過(guò)程中,可用頻閃儀對(duì)其溶液離心濃縮的情況進(jìn)行觀察,可實(shí)時(shí)控制樣品實(shí)驗(yàn)的進(jìn)度
6、在儀器設(shè)備運(yùn)行結(jié)束時(shí),轉(zhuǎn)子停止運(yùn)行后,蜂鳴器發(fā)出提示音后,此時(shí)便可取出離心管,獲取到所需濃縮后的樣品效果了
7、關(guān)閉冷阱,開始除霜回收冷阱中的溶劑。
樣品蛋白純化離心濃縮前后實(shí)驗(yàn)效果圖:
冷凍真空離心濃縮儀對(duì)蛋白純化離心濃縮的實(shí)驗(yàn)效果由上圖可看出,低溫純化離心濃縮樣品,可使樣品更安全。蛋白質(zhì)是包括人類在內(nèi)的各種生物有機(jī)體的重要組成成分,是生命的物質(zhì)基礎(chǔ)之一;而研究蛋白質(zhì)首要的步驟是將目的蛋白從復(fù)雜的大分子混合物中分離純化出來(lái),得到高純度具有生物學(xué)活性的目的物。因此,高效的純化技術(shù)和手段是蛋白質(zhì)研究的重要基礎(chǔ)和關(guān)鍵之一。
需要蛋白純化,要求除去其中混有的PBS緩沖液,以提高蛋白的濃度。蛋白純化需要獲得高純度、活性和產(chǎn)量的蛋白質(zhì)。冷凍真空離心濃縮儀采用離心力、真空和加熱相結(jié)合的方法使樣品中的溶劑快速蒸發(fā),從而達(dá)到濃縮樣品的目的。低溫濃縮,使樣品更安全。廣泛應(yīng)用于蛋白和分子結(jié)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室。